CUTANA™ CUT&Tag Kit添新品啦!助您轻松应对CUT&Tag实验
EpiCypher推出新品CUTANA™ CUT&Tag Kit,为组蛋白翻译后修饰(PTM)的超灵敏定位提供了全面的解决方案。CUTANA™ CUT&Tag Kit使用专有的Direct-to-PCR策略,在一个管中即可完成从细胞到PCR文库扩增,无需传统的文库制备流程,最大限度地减少样本损失。与多道移液器兼容,提高了通量和重复性。
蛋白质翻译后修饰 (PTM) 通过功能基团或蛋白质的共价添加、调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解来增加蛋白质组的功能多样性。这些修饰包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚**化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解,几乎影响正常细胞生物学和发病机制的所有方面。染色质免疫共沉淀技术(ChIP)作为用于研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的常用技术,仍然具有相当的局限性。近年来,基因组学和表观遗传学领域引入了两种新颖的染色质分析方法,即核酸酶靶向切割和释放技术(CUT&RUN)与靶向剪切及转座酶技术(CUT&Tag),克服了ChIP法的诸多缺点,令研究人员能够用更低的成本、更高的效率得到信噪比更高、重复性更好的实验结果。
欣博盛生物是EpiCypher授权全国代理商,如需咨询相关产品或咨询技术问题,请联系我们!
什么是CUT&Tag技术?
CUT&Tag全称Cleavage Under Targets and Tagmentation (CUT&Tag),是基于CUT&RUN的新兴姊妹技术。在EpiCypher的CUT&Tag实验流程中,孵育结合好特异性抗体与靶标蛋白后,加入蛋白 A、蛋白G与Tn5的复合物(pAG-Tn5),使得转座体进入细胞并与抗体结合,间接地固定在靶蛋白上;激活Tn5酶的切割活性,将靶蛋白结合的DNA区域切断,从而达到提取DNA、进行PCR扩增、构建文库的目的。在Tn5上融合了protein A/G抗体结合功能域的转座体pAG-Tn5是该技术的核心,使研究者不必碎裂染色质并跳过了传统的文库准备步骤(end repair, adapter ligation)。
CUT&Tag技术有何特色?
精简化的工作流程跳过了传统ChIP-seq具有挑战性的步骤,包括染色质碎片和抗体下拉,用更少的细胞和测序读段生成高分辨率数据。
◆ 更短的实验周期
在两天内能够完成从细胞到文库的建立,而传统的ChIP-seq需要五天(或更长时间)。
◆ 更少的细胞需求量与更低的成本
CUTANA™CUT&Tag分析仅使用10000-100000个细胞核即可生成高分辨率的图谱,甚至可用于单细胞水平测序,便于单细胞或珍贵样本的分析;与传统ChIP-seq(需要约3000万次读取)相比,CUT&Tag检测仅需要500-800万次测序读段,节省实验成本。
◆ 更高的信噪比
CUTANA™CUT&Tag使用较少的起始细胞、更少的测序读段,也能得到较低的背景信号和较强的目的信号。
◆ 无需文库准备步骤
测序文库的准备工作既费时又昂贵。通过在抗体结合的目标位点添加测序适配器,能够实现跳过传统的文库准备步骤(end repair, adapter ligation),极大地简化了实验流程。EpiCypher的CUTANA™CUT&Tag分析通过直接从反应混合物中扩增标记DNA进一步简化了这一策略,实现在一个管中完成从细胞到PCR文库扩增。
产品信息
货号 |
品名 |
规格 |
14-1102 |
CUTANA™ CUT&Tag Kit , Primer Set 1 |
48 reactions |
14-1103 |
CUTANA™ CUT&Tag Kit , Primer Set 2 |
48 reactions |
CUTANA™ CUT&Tag试剂盒:用户友好的表观基因组分析工具
试剂盒内包括CUT&Tags实验所需所有组分与对照品:
✔ 对照抗体 (Control antibodies)
✔ spike-in对照 (Nucleosome spike-in controls)
✔ 详细的质控分析评价指标 (Detailed quality control metrics)
✔ 故障排除小贴士 (Troubleshooting tips)
试剂盒组分(蓝色的为EpiCypher特有的组分)
名称 |
货号 |
pAG-Tn5 |
15-1017 |
H3K27me3 Positive Control Antibody |
13-0055t |
Rabbit IgG Negative Control Antibody |
13-0042t |
Anti-Rabbit Secondary Antibody |
13-0047 |
SNAP-CUTANA™ K-MetStat Panel |
19-1002t |
ConA Beads |
21-1401 |
Non-Hot Start 2X PCR Master Mix |
15-1018 |
8-strip Tubes |
10-0009t |
4.5 M NaCl |
21-1013 |
0.5 M EDTA |
21-1014 |
1 M MgCl2 |
21-1015 |
TAPS Buffer |
21-1016 |
SDS Release Buffer |
21-1017 |
SDS Quench Buffer |
21-1018 |
0.1X TE Buffer |
21-1019 |
Pre-Wash Buffer |
21-1020 |
Pre-Nuclear Extraction Buffer |
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